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安全灵敏稳定核酸染料 —— minired
发布时间:2019-02-04
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 常用的核酸染料分类

EB(溴化乙锭)

溴化乙锭是一种高度灵敏的嵌入性荧光染色剂,为强致癌诱变剂,但价格便宜。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。EB的这种特性使其成为一种核酸染料,常用于琼脂糖凝胶电泳中的核酸染色。溴化乙锭在紫外区302nm366nm处有吸收峰,在紫外光的照射下,溴化乙锭可被激发出橙红色的荧光(590nm)。结合有DNA的溴化乙锭复合物的荧光强度要比没有结合DNA的染料高出20-30倍,因此溴化乙锭可检测到少至10ngDNA条带,非常灵敏。

Gel GreenGel Red

Biotium公司研发推出的EB替代染料,染色效果和EB差不多,在紫外下不容易淬灭,可以用于胶回收。但价格较贵。
GelRed 
 GelGreen 是两种集高灵敏、低毒性和超稳定性于一身的极佳的荧光核酸凝胶染色ope电竞投注。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定,废弃物可直接倒入下水道,而不会造成任何环境污染。其特点有:
1
)高灵敏度:GelRed  GelGreen 是目前市场中最灵敏的凝胶核酸染料之一;
2
)稳定性极好:可以使用微波炉加热,可以在室温下保存;
3
)更安全:艾姆斯氏试验结果表明,该染料的诱变性远小于溴化乙锭(EB);
4
)广泛的适应性:适用于预制凝胶和凝胶电泳后染色;
5
)染色过程简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗;
6
)对 DNA  RNA 的迁移影响小:对核酸迁移的影响小于 SYBR Green I
7
)与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时,GelRed 可以完美的替代EB;使用 254nm 激发的 UV 凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置时,GelGreen 足以替代任意一种 SYB染料。但该染料会使小片段DNA迁移慢一些(与EB相比).

Gold View I/II

Goldview对于大片段DNA的染色效果良好,但是在对于500bp以下的片段效果不是很好,还有一个很致命的弱点是它的荧光基团在紫外灯下非常容易淬灭,一般5-10min条带就会消失。另外Goldview不适用于胶回收。Goldview其实就是AO(丫啶橙,一种剧毒产品)且荧光效果远不如EB,灵敏度差,本底色严重,不利用于回收,不稳定,在紫外灯下其诱导突变能力极高

 

SYBR Green SYBR Gold

稳定性差,也有毒性。它属于花箐素类核酸染料,花箐类染料不是无毒的,而只是低毒的,电泳级别的是经过修饰的,修饰有三种:1.加入卤素或氰基。2.插入环羟基。3.加入稳定剂。SYBR Green I是高灵敏的DNA荧光染料,适用于各种电泳分析,操作简单:无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强,背景信号低。SYBR GreenSYBR Gold相对于EB的稳定性要差很多。SYBR系列的染料也能进入细胞染色线粒体以及核内的DNA,从而产生危害。SYBR Green I已被证实在紫外光下将会产生强诱变能力,使DNA或其他物质发生突变。


Minibio的核酸染料minired 具有安全、灵敏度高、可生物降解等突出特点,可替代EB作为各种核酸电泳的染色剂,该荧光染料在紫外和可见光区皆有较强的吸收,所以该染料既可以在紫外光下观察,也可在蓝绿可见光下观察,检测灵敏度比EB类染料高10倍左右。

 

无毒性

minired独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB

灵敏度高

适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I

稳定性高

适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

信噪比高

样品荧光信号强,背景信号低。

操作简单

 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

适用范围广

可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNAssDNA  RNA 染色。

EB有相同的光谱特性

标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是miniRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。


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